几种鸡传染性鼻炎培养基的比较

日期:2020-01-14编辑作者:疾病防治

  培养基是人工制备的营养物质,是细菌维持与繁殖的基础。培养副鸡嗜血杆菌不仅需要蛋白胨、糖类、无机盐等基础的氮源和碳源外,还需要健康动物血清、酵母浸汁及辅酶等特殊营养物质。这是因为健康动物血清中含有生长繁殖所必须的各种蛋白质和多种游离氨基酸及适于细菌生长繁殖的v因子和X因子,是促进细菌代谢的重要物质。另外,培养基中加人酵母可补充某些维生素和生长因子,都是副鸡嗜血杆菌生长繁殖所必须的营养物质。鸡传染性鼻炎(Ic)可引起鸡的上呼吸道感染。该病的病原菌为副鸡嗜血杆菌(HPG).是一种在宿主体外板易失活的脆弱细菌。副鸡嗜血杆菌的生长小仅需要特殊的培养基,且培养条件也很苛刻,给临床的分离和培养带来困难,因此,我们分别用半合成葡萄糖培养基、牛心汤培养基、鸡肉浸液培养基的进行试验.比较各培养基中副鸡嗜血杆菌生长数量差异。
l. 材料与方法 1.1菌体HPG0083 由澳大利亚布莱克博士惠赠。
1.2 培养基 1.2.1半合成葡萄糖培养基,主要成分:多蛋白胨、酵母粉、氯化钠、味精、葡萄糖等。 1.2.2 半合成乳糖培养基,主要成分:多蛋白胨、酵母粉、氯化钠、味精、乳糖等。 1.2.3 牛心汤培养基,主要成分:牛心浸液、多蛋白胨、酵母粉、氯化钠等。 1.2.4 牛肉浸液培养基,主要成分:牛肉浸液、胰蛋白胨、酵母粉、磷酸二氢钠等。 1.2.5 鸡肉浸液培养基,主要成分:鸡肉浸液、B族维生素、淀粉等。 1.2.6 马丁肉汤培养基,主要成分:马丁肉汤内添加葡萄糖、维生素、淀粉等。以上培养基在制备过程中,还需要增加5%的健隶鸡血清和适量辅酶等。另外,半合成葡萄糖培养基中设一组加5%的牛血清,与加鸡血清的同类培养基作比较。
1.3 将HPG0083接种到6日龄SPF鸡胚中,37℃孵育24h。取其卵黄,接种到以上各种培养基的平皿上,置于含有5%CO:培养箱内,24—36h内挑选典型菌落,分别接种到等量的半合成葡萄糖培养基、半合成乳糖培养基、牛心汤培养基、牛肉汤培养基、鸡肉浸液培养基及马丁肉汤培养基,37℃培养36h后,分别进行细菌计数。细菌计数按常规平板计数法操作。
1.4 将前4种含菌培养液.分别于培养12h、24h、36h和48h,对不同时间各培养基中HPG进行活菌计数。
2. 结果 2.1副鸡嗜血杆菌在上述6种培养基中37℃培养36h时的含菌数量
2.2 用葡萄糖、乳糖、牛心汤、牛肉汤培养基培养副鸡嗜血杆菌,在37℃培养12h、24h、36h和48h,各培 养液中HPG数量
2.3 半合成葡萄糖培养基中分别加入5%的牛血清和5%的健康鸡血清,接种副鸡嗜血杆菌,37℃培养36h后进行活菌计数
3. 小结 3.1 试验表明,半合成葡萄糖培养基与半合成乳糖培养基比其它四种培养基增菌效果明显,说明这两种培养基所含的营养物质和活性因子适于该菌的生长繁殖;37℃CO2:培养箱内培养36h,副鸡嗜血杆菌数量达到高峰,在葡萄糖培养基中含菌量为108个/ml。
3.2 半合成葡萄糖培养基中加入健康鸡血清和牛血清培养副鸡嗜血杆菌的结果表明,鸡血清1禽有的营养因子比牛血清更适合副坞嗜血杆菌的譬:长需要。这可能与它们的同源性有关。
3.3 通过几种培养基的比较及不同培养时间的活菌计数,若培养该菌进行疫苗生产,最适宜的条件为:用半合成葡萄糖培养基在含有5%CO2环境中37℃培养36h

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